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UHPLC反相色譜柱性能優(yōu)點(diǎn)：

(1) 在正相和反相中都能有應(yīng)用

(2) 穩(wěn)定的高覆蓋率的單鍵合相，充分封端球型

(3) 較低的疏水性，由于氰基的存在，具有*的選擇性

(4) 與裸硅膠不同的選擇特性；與裸硅膠柱相比，色譜柱的平衡時(shí)間快。

 

UHPLC反相色譜柱在使用緩沖液的過(guò)程中還要注意以下幾點(diǎn)：

a.避免使用鹽酸鹽，鹽酸鹽對(duì)鋼質(zhì)有腐蝕作用；

b.緩沖液要現(xiàn)配現(xiàn)用，往往緩沖液是良好的菌類培養(yǎng)液，隔天或放置長(zhǎng)時(shí)間實(shí)驗(yàn)時(shí)會(huì)發(fā)生很多怪現(xiàn)象；

c.使用緩沖液要及時(shí)掌握pH范圍，做到胸中有數(shù)；

d.清洗液路和柱子時(shí)，有溫控可加熱到30攝氏度易于沖洗；

e.長(zhǎng)時(shí)間用緩沖溶液要注意觀察接頭處有無(wú)析出，若有白色鹽類析出，定期用10%硝酸沖洗液路可以避免液路的堵塞；

f.選擇緩沖液要用可靠的試劑，避免不純的鹽類造成不必要的麻煩；過(guò)渡流動(dòng)相是指有機(jī)相和水相的組成與分析流動(dòng)相相同，但是不含緩沖鹽的溶液。

 

UHPLC反相色譜柱為色譜柱提供方便、經(jīng)濟(jì)和有效的保護(hù)，延長(zhǎng)了色譜柱的壽命，保證分析結(jié)果的重現(xiàn)性。隨著使用時(shí)間的增加，液相色譜柱分離效能下降，柱壓增高，其原因主要是由于色譜柱進(jìn)口段的少量填料被污染引起的，而色譜柱整個(gè)柱床并未被破壞，使用保護(hù)柱，相當(dāng)于在色譜柱前增加了一段額外的填料，起到了保護(hù)整個(gè)色譜柱的作用。