NH2氨基色譜柱的使用:
需要注意的是,NH2氨基色譜柱的鍵合官能團(tuán)氨丙基要比C18,C8柱的鍵合官能團(tuán)C18,C8要容易水解,所以首先要做好其使用壽命稍遜的心理準(zhǔn)備,特別是當(dāng)你的使用條件是反相條件下時(shí)。
反相條件下使用時(shí),要特別注意控制PH值范圍,PH值越低越有發(fā)生水解的危險(xiǎn),流動(dòng)相中水的比例越高當(dāng)然也越有發(fā)生水解的危險(xiǎn)。所以,在使用后以及準(zhǔn)備長(zhǎng)時(shí)間放置該柱時(shí),必要的清洗和將氨基柱保存于純的有機(jī)溶劑中是很好的保養(yǎng)措施。
有一種情況是,當(dāng)使用NH2氨基色譜柱進(jìn)行酸性物質(zhì)如果汁的分析時(shí)(分析其中的糖份),酸性物質(zhì)的存在意味著質(zhì)子的存在,可能會(huì)使略帶負(fù)電荷的氨基官能團(tuán)質(zhì)子化,導(dǎo)致使用一段時(shí)間后對(duì)于某些類的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現(xiàn)在柱效下降。
NH2氨基色譜柱的清洗
(1)平時(shí)在正相條件下使用:
首先用50倍柱體積的異丙醇清洗,因異丙醇粘度較大需適當(dāng)放低流速;之后,用50倍的甲醇清洗;之后,用異丙醇過渡回到平常使用的正相流動(dòng)相,即可。
(2)平時(shí)在反相條件下使用:
緩沖鹽應(yīng)及時(shí)沖洗,不能直接用純甲醇沖洗緩沖鹽等,屬常識(shí)就不作特別交待。
用50倍純甲醇沖洗;之后,用異丙醇過渡后,用二氯甲烷沖洗色譜柱;之后,再用異丙醇過渡回來到甲醇條件下。